北京细胞实验室噬菌体感染大肠杆菌解决办法

  • 发布时间:2023-10-19 17:49:29,加入时间:2021年03月17日(距今1345天)
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噬菌体污染是实验室中常见的问题,但可以采取一些方法来预防和清除噬菌体污染。噬菌体是感染细菌、真菌、藻类 、放线菌或螺旋体等微生物的病毒的总称。作为病毒的一种,噬菌体具有病毒的一些特性:个体微小;不具有完整的细胞结构;只含有单一核酸。其特别之处在于噬菌体是专以细菌为“食物”的病毒。

噬菌体污染:液体培养基溶氧急剧上升,产生大量气泡,在较短时间内菌体大量自溶,发酵液最终变清。固体培养基出现噬菌斑。

噬菌体感染细菌有两种结果:

能在宿主细胞内复制增殖,产生许多子代噬菌体,并最终裂解细菌,建立溶菌周期——毒性噬菌体(virulent phage)

噬菌体基因与宿主染色体整合,成为前噬菌体,细菌变成溶原性菌,不产生子代噬菌体,但噬菌体DNA能随细菌DNA复制,并随细菌的分裂而传代,建立溶原状态——温和噬菌体(temperate phage)

以下是针对细菌培养和相关实验过程中对噬菌体进行预防和清除的一系列措施

预防噬菌体污染:

1. 采用无菌技术:确保在实验中使用无菌技术,包括使用无菌试剂和培养物,以减少噬菌体的引入。

2. 维护洁净实验室环境:维持实验室的清洁,定期消毒实验室表面和设备,以减少噬菌体的传播。

3. 遵循规范操作程序:遵守实验室安全和操作规程,包括正确处理和处置垃圾,以避免噬菌体污染的风险。

4. 储存培养物:定期检查并维护细菌培养物库存,确保培养物的纯度,以减少噬菌体感染的风险。

清除噬菌体污染:

1. 隔离被感染的细菌培养物:如果怀疑培养物受到噬菌体感染,将其与其他细菌隔离,以阻止感染传播。

2. 使用抗噬菌体剂:一些抗噬菌体剂可以用于清除感染,如孤噬菌体(bacteriophage)的治疗。

3. 冻存备份培养物:定期冻存备份培养物,以便在感染发生时能够重新开始培养而不受噬菌体污染影响。

4. 使用PCR检测:使用聚合酶链式反应(PCR)等分子生物学方法检测噬菌体感染,以及监测细菌培养物的纯度。

5. 培养敏感细胞株:对于特别敏感的细胞株,可以选择使用已知无噬菌体感染的培养物,以减少感染风险。

噬菌体污染可能会对实验结果产生不利影响,因此实验室应该采取预防措施并保持高度警惕,以减少噬菌体感染的可能性。如果感染已经发生,及早采取清除措施是至关重要的。

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