圆二色谱仪CD检测

  • 发布时间:2023-08-16 00:49:37,加入时间:2022年10月25日(距今790天)
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圆二色光谱(简称CD)是应用最为广泛的测定蛋白质二级结构的方法,是研究稀溶液中蛋白质构象的一种快速、简单、较准确的方法。它可以在溶液状态下测定,较接近其生理状态。而且测定方法快速简便,对构象变化灵敏,所以它是目前研究蛋白质二级结构的主要手段之一,并已广泛应用于蛋白质的构象研究中,也可用来测定核酸和多糖的立体结构。

液体CD和固体CD

1,液体CD请务必逐个备注样品成分及寄样浓度,同时需备注下用什么溶液稀释;固体CD需备注样品成分。

2,如需解析二级结构,需要知道氨基酸数目和分子量,可以提供数据分析服务

液体CD

1,测试时需要空白溶剂做对照扣背景,麻烦样品及溶剂至少各备5ml;

2,样品及溶剂的浓度对测试影响较大,不宜过高或过低(浓度过高,会超电压,数据不准;浓度过低,没有信号):不同物质,浓度不同,测试时不对浓度进行摸索

a.如之前测过CD或有相关文献,建议按对应浓度准备;b.如没测过CD或无文献,但扫过紫外全谱,建议优选紫外浓度的一半配制样品,如不合适再调整(直接用紫外对应浓度,测CD的话浓度偏高);c.如以上均无,建议按0.5mg/ml来配(蛋白质样品,浓度一般0.1-0.5mg/ml),但无法保证该浓度合适

3,测试结果一般提供原始数据,若需拟合后百分比数据请下单前告知;

4,每个样品默认测一次,若需平行则按照多个样品收费。

固体CD

1,将样品和溴化钾(光谱纯度)1:150混合后研磨尽可能细致;

2,光谱纯溴化钾研磨细致作为空白对照。注:溴化钾吸潮,样品邮寄前密封好一些。

3,样品量(至少):150-200 mg/样, 是粉末样品。 

4.如果样品透过率不好,建议采用积分球模式。

当用压片法或石蜡油研磨法进行固体粉末样品测试时,要尽可能地研磨获得细小均匀的样品颗粒。采用石蜡油糊方法时,必须注意某些憎水有机化合物可能溶于石蜡油中,这时所得CD光谱在某种意义上应视为溶液CD光谱。采用压片法测试固体CD时,在保证手性样品的定性浓度达到CD光谱仪检测要求的同时,片越薄越透明越好(但切忌破损)。在某些情况下,压片法不适用于手性抗衡阴离子存在下的固体诱导CD光谱的测定

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