核酸检测不单要注重生物安全的防护,更要注意预防核酸实验室的污染,一旦实验室污染将对群众身体健康、环境、医院医疗体系运行、疫情防控形势、医院经济及社会效益生产十分消极的影响
新冠核酸检测异常扩增曲线
异常扩增曲线之一就是“内标污染”
特点:较为常见,表现为阴性对照、生理盐水,或者试剂空白内标出现阳性扩增曲线。
原因分析:
1、操作不规范,有标本残液或气溶胶通过加样枪、镊子、手等造成携带污染;
2、生物安全柜、实验操作台、环境等消毒清洁不到位
异常扩增曲线之二“标本N/ORF1ab检测通道出现S型扩增曲线”
特点:
一个或多个孔N/ORF1ab检测通道出现典型或者非典型的S型扩增曲线
原因分析:
1、 阳性质控品处理不够小心,造成污染。
2、 环境中荧光物质,如手套滑石粉等污染,产生非特异荧光信号。
新冠核酸实验室污染的表现多为:假阳性的渐进式、散发式、突发式增多,同时更多的案例表现为阴性对照出现阳性荧光信号(扩增曲线),因此该新冠核酸实验室极大可能已被污染。
目前核酸实验室污染的主要类型有:1.标本污染;2.试剂污染;3.扩增产物污染;4.设备污染;5.其他污染。
标本污染主要是容器被污染、容器密封不严造成样品被污染等;
试剂污染主要是在体系试剂配制加样过程中,由于加样器、容器、双蒸水、阴性对照及其它试剂被PCR核酸模板或阳性对照污染;
扩增产物污染主要是PCR实验室中最主要、最常见的污染。扩增产物拷贝量大,极其微量的泄露就可以引起假阳性结果的产生,其形成气溶胶含长短不一核酸片段小颗粒,沉降到操作台面、扩增仪等物体及空气中造成扩增及产物分析区或者实验室大面积的污染;
设备污染主要是仪器接触了PCR核酸模板、阳性对照、扩增产物未清除或无法清除造成的污染,其往往表现为特定的孔位假阳性,同一区域的其他环境监测点(如:操作台面、空气等)多为阴性结果;
其他污染主要是不明污染原因的污染,因此该新冠核酸实验室可能为扩增产物污染污染。
污染源清除方法:
核酸检测每批次实验结束后应严格按以下消毒顺序进行为期7天的清洁消毒。
1.清洗空调过滤网;
2.75%酒精对污染区域空气进行喷雾(确保安全的前题下);
3.使用PCR Cleaner对扩增及产物分析区仪器设备(如基因扩增仪扩增仓与外表等)擦拭;
4.新鲜配制1000 mg/L有效氯84消毒液分别擦拭工作台面、冰箱和传递窗把手;
5.作用10min后用清水擦拭上述仪器设备及工作台面等物表;
6.新鲜配制1000 mg/L有效氯84消毒液拖擦地面,打开实验室紫外灯照射≥1h;
7.保持开窗通风排气。
实施污染源清除验证:
按照污染源清除方法对扩增及产物分析区实行7天清洁消毒去污染源后,对该区域的操作台面、荧光定量基因扩增仪扩增仓、空气等环境监测点连续3天核酸监测,连续3天检测核酸阴性,判定为污染源清除成功,实验室可正常使用运行
近年来,化学消毒剂与物理技术相结合的过氧化氢消毒干雾新技术已在国外逐渐应用并引入我国。经实验认证,该消毒技术在环境消毒效果、与物体的兼容性、安全环保性均具有良好性能。比林科汉核酸去除仪+过氧化氢杀孢子剂(高纯低浓度)的完美配合,组成无懈可击空间消毒方案,高效分解DNA、RNA污染源及核酸酶等分子物质,适用核酸实验室气溶胶污染。